Bastas Squad Forum :: Forum Zakręconych Mikrobiologów
Forum Bastas Squad Forum Strona Główna
 FAQFAQ   SzukajSzukaj   UżytkownicyUżytkownicy   GrupyGrupy    GalerieGalerie   RejestracjaRejestracja 
 ProfilProfil   Zaloguj się, by sprawdzić wiadomościZaloguj się, by sprawdzić wiadomości   ZalogujZaloguj 

 
Precypitacja Etanolem czyli pseudokoncetracja DNA

 
Napisz nowy temat   Odpowiedz do tematu    Forum Bastas Squad Forum Strona Główna -> Porady
Zobacz poprzedni temat :: Zobacz następny temat  
Autor Wiadomość
Karolina.Rudnicka
hiper-aktywny forumowicz



Dołączył: 20 Lip 2007
Posty: 152
Przeczytał: 0 tematów

Pomógł: 1 raz
Ostrzeżeń: 0/5
Skąd: Tromso

PostWysłany: Śro 13:09, 12 Wrz 2007
Tak sobie pomyslalam a noz widelec Przemek sie pojawi albo wy wymyslicie albo znajdziecei na necie cos wiecej niz ja znalazlam.

Probrem jest natury chemiczno technicznej i polega na tym ze stosujac precypitacje etanolem 100 i innymi odczynnikami stezenie DNA nadal pozostaje takie samo jak wczesniej.Biorac pod uwage ze poczatkowo mialam np 100ul stezenia 0,01 a w efekcie dostaje 10ul 0,01 mozna powiedziec ze bo prodze zgubilam nawet troche(nie troche tylko wiele) DNA.

stosuje taka procedure :

do 100ul proby dodaje 100ul mieszaniny chloroform fenol mieszam wiruje 1300rpm 1min zbieram faze wodna i dodaje kolejno 36ul 7,5 M ammonium acetate 2ul glikogenu(10mg/ml) i 270ul czystego etoh inkubuje w -20 30min wiruje 20min 1300 usuwam supernatant plucze 70%etoh usuwam supernatant zawieszam w 10ul buforu TE ph8

Czekam na poprawki z waszej stronu strzala


Post został pochwalony 0 razy
Powrót do góry
Zobacz profil autora
Marta
hiper-aktywny forumowicz



Dołączył: 20 Lip 2007
Posty: 238
Przeczytał: 0 tematów

Pomógł: 1 raz
Ostrzeżeń: 0/5
Skąd: Łódź

PostWysłany: Śro 20:36, 12 Wrz 2007
Kurcze ja kitem robiłam, więc nic z własnego doświadczenia, pewnie w google szukałaś już...ja trafiłam na takie m.in. strony
[link widoczny dla zalogowanych]
[link widoczny dla zalogowanych]
[link widoczny dla zalogowanych]
to coś po polsku, ale nie wiem czy się w ogóle przyda
[link widoczny dla zalogowanych]
[link widoczny dla zalogowanych]

Pewnie już to wszystko przeglądałaś wcześniej, ale na nic konkretnego nie wpadałam


Post został pochwalony 0 razy
Powrót do góry
Zobacz profil autora
Karolina.Rudnicka
hiper-aktywny forumowicz



Dołączył: 20 Lip 2007
Posty: 152
Przeczytał: 0 tematów

Pomógł: 1 raz
Ostrzeżeń: 0/5
Skąd: Tromso

PostWysłany: Pon 14:33, 17 Wrz 2007
Dziala tylko trzeba wydluzyc inkubacje w -20 stopniach. Widac dobrze precypitat ale potem jak sie odwirowuje mozna sie zdziwic bo mimo ze wirowanie w 4 stopniach to precypitatu wogole nie zauwazysz. Potem po przemyciu 70 alko trzeba dlugo czekac az calkiem odparuje (bo jak zostanie troche to potem interferuje podczas sekwencjonowania wszystkie syfy widac) i sie rozpuszcza w TE. DZIALA.

Post został pochwalony 0 razy
Powrót do góry
Zobacz profil autora
Marta
hiper-aktywny forumowicz



Dołączył: 20 Lip 2007
Posty: 238
Przeczytał: 0 tematów

Pomógł: 1 raz
Ostrzeżeń: 0/5
Skąd: Łódź

PostWysłany: Pon 21:53, 17 Wrz 2007
To super!!!!Cieszę się, że działa i oby tak dalej!!

Post został pochwalony 0 razy
Powrót do góry
Zobacz profil autora
Wyświetl posty z ostatnich:   
Napisz nowy temat   Odpowiedz do tematu    Forum Bastas Squad Forum Strona Główna -> Porady Wszystkie czasy w strefie EET (Europa)
Strona 1 z 1

 
Skocz do:  
Możesz pisać nowe tematy
Możesz odpowiadać w tematach
Nie możesz zmieniać swoich postów
Nie możesz usuwać swoich postów
Nie możesz głosować w ankietach

 

fora.pl - załóż własne forum dyskusyjne za darmo

Template Boogie by Soso
Powered by phpBB © 2001, 2002 phpBB Group
Regulamin